Пляма від Грама: як воно виготовляється і для чого воно призначене

Зміст

• Як робиться фарбування за Грамом
• Навіщо це

Фарба за Грамом, або просто Грам, - це швидкий і простий прийом, який спрямований на диференціацію бактерій відповідно до характеристик їх клітинної стінки після впливу різних барвників та розчинів.

Таким чином, за допомогою фарбування за Грамом, крім форми бактерій, можна перевірити колір, який вони набувають, і цей результат важливий для визначення інших стратегій ідентифікації видів бактерій та для вказівки лікаря профілактичного лікування за мікроскопічно спостережуваними характеристиками.

Фарбування по Граму зазвичай проводиться регулярно в лабораторії і є частиною іспиту на бактеріоскопію. Зрозумійте, що таке бактеріоскопія і як це робиться.

Як робиться фарбування за Грамом

Плями за Грамом - це швидкий, практичний і недорогий метод ідентифікації бактерій, відповідальних за інфекції, корисний для лікарів для попередження профілактичного лікування інфекції, яка може відбутися, оскільки відомі специфічні характеристики цих груп бактерій,

Фарбування за Грамом проводиться в 7 основних етапів, проте протокол може відрізнятися залежно від лабораторії:

1. Помістіть на предметне скло кілька колоній бактерії, додавши краплю води, щоб полегшити гомогенізацію колоній;
2. Дайте йому трохи висохнути, і лезо може швидко пройти крізь полум’я, сприяючи висиханню, однак важливо звертати увагу на температуру, оскільки, якщо температура занадто висока, можливо, що структура структури бактерії, які можуть заважати результату іспиту;
3. Коли предметне скло висохне, покрийте фіолетовим кришталевим барвником і дайте йому діяти приблизно 1 хвилину;
4. Промийте предметне скло струменем проточної води і покрийте предметне скло люголем, метою якого є фіксація синього барвника, і дайте йому діяти протягом 1 хвилини. Обидва типи бактерій можуть поглинати комплекс, утворений барвником і люголем, стаючи синім;
5. Потім промийте предметне скло проточною водою і нанесіть 95% спирту, залишивши діяти протягом 30 секунд. Спирт відповідає за розчинення ліпідної мембрани, яка утворює грамнегативні бактерії, і, таким чином, за видалення комплексу, що утворюється між барвником і люголем, знебарвлення цих бактерій. Однак у разі грампозитивних бактерій алкоголь зневоднює клітинну стінку грампозитивних бактерій, змушуючи пори стискатися і робить їх непроникними;
6. Потім знову промийте в проточній воді і покрийте предметне скло другим барвником, фуксином або сафраніном і дайте йому діяти протягом 30 секунд;
7. Потім промийте предметне скло під проточною водою і дайте йому висохнути при кімнатній температурі.

Як тільки предметне скло висохне, можна покласти краплю занурювального масла і спостерігати предметне скло під мікроскопом із об'єктивом 100x, при цьому можна перевірити наявність або відсутність бактерій, а також наявність дріжджів та епітеліального клітин.

Навіщо це

Основне завдання фарбування за Грамом - диференціювати бактерії відповідно до характеристик клітинної стінки та загальної морфології. Таким чином, відповідно до характеристик, що спостерігаються під мікроскопом, бактерії можна класифікувати на:

• Грампозитивні бактерії, які візуалізуються блакитним кольором через те, що вони не обесцвечуються спиртом, оскільки вони мають більш товсту клітинну стінку і їх пори стискаються під впливом люголю;
• Грамнегативні бактерії, які візуалізуються з рожевим / фіолетовим кольором через те, що вони знебарвлюються спиртом і фарбуються сафраніном або фуксином.

Після перегляду бактерій під мікроскопом не виключено, що в лабораторії будуть проведені подальші тести для виявлення видів бактерій. Однак за допомогою Грама та асоціації з ознаками та симптомами, представленими людиною, лікар може призначити профілактичне лікування, поки не з’являться результати більш конкретних обстежень, оскільки таким чином можна зменшити швидкість розмноження бактерій та запобігти ускладненням.