Електрофорез: що це, для чого він потрібен і як це робиться

Зміст

• Навіщо це
• Як це робиться
• Види електрофорезу
• 1. Електрофорез гемоглобіну
• 2. Електрофорез білка

Електрофорез - це лабораторна техніка, що проводиться з метою поділу молекул за їх розмірами та електричним зарядом, щоб можна було діагностувати захворювання, перевірити експресію білка або ідентифікувати мікроорганізми.

Електрофорез - це проста та недорога процедура, яка використовується в лабораторних робочих та дослідницьких проектах. Відповідно до мети електрофорезу, можливо, доведеться провести інші тести та обстеження, наприклад, для встановлення діагнозу.

Навіщо це

Електрофорез може виконуватися з різними цілями, як у дослідницьких проектах, так і в діагностиці, оскільки це проста і недорога техніка.Таким чином, електрофорез можна проводити для:

• Ідентифікувати віруси, грибки, бактерії та паразити, причому це застосування частіше зустрічається у науково-дослідних проектах;
• Тест на батьківство;
• Перевірити експресію білків;
• Визначити мутації, наприклад, корисні для діагностики лейкемії;
• Проаналізуйте типи циркулюючого гемоглобіну, корисні для діагностики серповидно-клітинної анемії;
• Оцініть кількість білків, що містяться в крові.

Відповідно до призначення електрофорезу може знадобитися проведення інших додаткових обстежень для лікаря для завершення діагностики.

Як це робиться

Для проведення електрофорезу потрібен гель, який може бути поліакриламідом або агарозою залежно від призначення, буфером для електрофорезу та чаном, маркером молекулярної маси та флуоресцентним барвником, на додаток до ультрафіолетового або світлодіодного світлового обладнання, також відомого як трансілюмінатор.

Після приготування гелю потрібно помістити певний предмет, щоб лунки були зроблені в гелі, який в народі називають гребінцем, і дати гелю схопитися. Коли гель готовий, просто нанесіть речовини на лунки. Для цього в одній з лунок повинен бути поміщений маркер молекулярної маси, позитивний контроль, який є речовиною, яка відома, що це, негативний контроль, який гарантує достовірність реакції, і зразки для аналізу. Усі зразки повинні бути змішані з флуоресцентним барвником, оскільки таким чином можна візуалізувати смуги на просвічувачі.

Гель із зразками потрібно помістити в чану для електрофорезу, що містить конкретний буферний розчин, а потім пристрій увімкнути, щоб був електричний струм і, отже, різниця потенціалів, що важливо для поділу частинок відповідно до їх навантаження і розмір. Тривалість електрофоретичної роботи залежить від мети процедури і може тривати до 1 години.

Після зазначеного часу можна переглянути результат електрофоретичного пробігу через просвічувач. Коли гель поміщений під ультрафіолетове або світлодіодне світло, можна візуалізувати смуговий малюнок: чим більша молекула, тим менша її міграція, наближаючись до свердловини, тоді як чим легша молекула, тим більший міграційний потенціал.

Для перевірки реакції необхідно візуалізувати смуги позитивного контролю, а в негативному контролі нічого не візуалізувати, оскільки в іншому випадку це є ознакою забруднення, і весь процес повинен бути повторений.

Види електрофорезу

Електрофорез можна проводити з різними цілями, і, відповідно до його призначення, можна використовувати декілька типів гелів, найпоширенішими з яких є поліакриламід та агароза.

Електрофорез для ідентифікації мікроорганізмів частіше проводиться в дослідницьких лабораторіях, однак для діагностичних цілей електрофорез може використовуватися для виявлення гематологічних захворювань та захворювань, що еволюціонують із збільшенням кількості білків, будучи основними видами електрофорезу:

1. Електрофорез гемоглобіну

Електрофорез гемоглобіну - це лабораторна техніка, що проводиться для ідентифікації різних типів гемоглобіну, що циркулює в крові, що дає можливість виявити наявність захворювань, пов’язаних із синтезом гемоглобіну. Тип гемоглобіну визначають за допомогою електрофорезу при певному рН, в ідеалі від 8,0 до 9,0, з малюнком смуг, який можна порівняти із нормальним, дозволяючи ідентифікувати аномальні гемоглобіни.

Для чого він призначений: Електрофорез гемоглобіну проводиться для дослідження та діагностики захворювань, пов’язаних із синтезом гемоглобіну, таких як серповидноклітинна анемія та хвороба гемоглобіну С, крім того, що він корисний для диференціації таласемії. Дізнайтеся, як інтерпретувати електрофорез гемоглобіну.

2. Електрофорез білка

Електрофорез білків - це обстеження, яке вимагає лікар, щоб оцінити кількість білків, що циркулюють у крові, і, таким чином, виявити захворювання. Це дослідження проводиться на зразку крові, який центрифугують для отримання плазми - частини крові, що складається, серед інших речовин, з білків.

Після електрофорезу можна візуалізувати зразок смуг і, згодом, графік, на якому вказується кількість кожної фракції білків, є основним для діагностики.

Для чого він призначений: Електрофорез білків дозволяє лікарю дослідити виникнення множинної мієломи, дегідратації, цирозу, запалення, захворювань печінки, панкреатиту, вовчака та гіпертонії відповідно до смугової картини та графіку, представленого у звіті про обстеження.

Зрозумійте, як це робиться і як зрозуміти результат електрофорезу білка.